四区划线法的操作步骤，简述三区划线法的方法

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四区划线法步骤，四区划线法的原理这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧！

1、四区划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。

2、有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。

3、其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。

4、划线的形式有多种，可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区，第四区(D区)，则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。

5、为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D>C>B>A。

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