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大肠杆菌乳糖操纵子的结构,乳糖操纵子的结构这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、感知细胞内乳糖水平,根据细胞内乳糖的水平来调控β半乳糖苷酶的表达。
2、乳糖操纵子有以下几个部分:(1)调节基因:调节分泌阻遏物。
3、(2)启动子:启动基因的转录和翻译。
4、(3)操纵基因:与乳糖的结合部位。
5、(4)半乳糖苷酶基因Z、Y、A。
6、在无乳糖时,调节基因表达阻遏蛋白,结合在位于启动子后的操作基因上,阻止转录的进行,半乳糖苷酶基因不转录。
7、当乳糖存在时,乳糖与阻遏蛋白结合,使得阻遏蛋白不能与操作基因结合,半乳糖苷酶基因转录。
8、应用:(1)用于鉴定目的基因是否插入载体。
9、载体上含有改造过的乳糖操纵子。
10、该乳糖操纵子仅保留半乳糖苷酶基因N端,且在半乳糖苷酶的基因中插入多克隆位点。
11、该载体的宿主为仅能表达半乳糖苷酶C端多肽的大肠杆菌。
12、半乳糖苷酶C端多肽或N端多肽单独存在时,无活性;两者共存时,可发挥半乳糖苷酶活性,可将X-gal分解成蓝色产物。
13、将载体转入培养于含X-gal的培养基的大肠杆菌中,用IPTG(乳糖类似物)诱导,如果菌落变成蓝色,则说明目的基因未插入;菌落呈白色,则说明目的基因插入。
14、(2)用于特异性表达目的基因。
15、在目的基因前加乳糖操纵子,则当细胞内无乳糖时,该基因不表达;往培养基中加入乳糖或IPTG后,基因表达。
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